植物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒代測樣本需要注意的

植物標(biāo)本的精采集及保存 
1、 稱取0.1g（誤差±3%以內(nèi)）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；
2、 加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度過夜；
3、 于4度，8000rpm，離心1小時，取上清；
4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%yimi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮?dú)獯蹈桑４鎮(zhèn)溆茫?/span>
5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液（1ml定容）。混勻后室溫放置30分鐘，然后4度離心（8000rpm，15分鐘），取上清并暫時保存于4度待用。

6.植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測定：（粗提取）
1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；
2、 加入樣品體積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩沖液）,3、 請于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時保存于4度待用。

樣本收集注意事項

1、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2、標(biāo)本采集后盡快進(jìn)行實驗，若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、我們羅列的是通用的樣本處理方法，無法涵蓋各種樣本，對于一些特殊樣本，建議實驗人員多參考已發(fā)表的文獻(xiàn)，自行設(shè)計合理的樣本處理方法。

計算方法示例：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中

以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。將樣本的OD值為X值代入方程式，所得的Y值即是我們的樣本值。（如上圖所示）