分享！植物elisa檢測試劑盒的實驗步驟和注意事項

發布時間：2022-12-27 點擊次數：1711次

　　在植物elisa檢測試劑盒檢測中除了包被外，一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性，例如規定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管，保持準確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規定配制。加樣時應將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現氣泡。

　　植物elisa檢測試劑盒的實驗操作步驟：

　　1、把試劑混勻，切記實驗時不要加理大量含有泡沫的液體，避免實驗產生誤差。

　　2、跟數據測樣決定板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

　　3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

　　4、甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

　　5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

　　6、甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

　　7、每孔加入底物各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。

　　8、取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

　　9、在450nm波長處測定各孔的OD值。

　　操作注意事項：

　　1、試劑應按標簽說明儲存，使用前恢復到室溫.稀稀過后的標準品應丟棄；

　　2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存；

　　3、用干凈的塑料容器配置洗滌液，用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品；

　　4、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水；

　　5、底物A應揮發避免長時間打開蓋，底物B對光敏感避免長時間暴露于光下；

　　6、加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

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